AST/GOT能使α-酮戊二酸和天门冬氨酸转换氨基和酮基,生成谷氨酸和草酰乙酸。草酰乙酸在反应过程中可自行脱羧成丙酮酸。丙酮酸与2,4-二硝基苯肼反应生成2,4-二硝基苯腙,在碱性溶液中显红棕色。比色后,查标准曲线,可求得酶活力单位。
包装信息
1. 试剂配制 :
0.4mol/L NaOH 溶液的配制 : 临用时按4mol/L NaOH 溶液:双蒸水=1:9 的比例稀释,需多少配多少 , 室温密封保存。
2. 操作表:
轻轻水平摇动96孔板混匀,室温放置15分钟,510nm波长,酶标仪测各孔OD值,以(绝对OD值=测定孔
OD值-对照孔OD值),查标准曲线,求得相应的AST/GOT活力单位。
附肝脏样本前处理:
准确称取组织重量,按重量(g):体积=1:9 的比例,加入9倍体积的生理盐水,冰水条件下机械匀浆,制备成10%的组织匀浆,2500转/分,离心10分钟,取上清液,再用生理盐水10倍稀释成1%的浓度待测。(同时取部分上清液测蛋白浓度,蛋白定量试剂盒本公司有售,货号为WLA004)